如何選擇正確的胎牛血清(FBS)?
胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的關(guān)鍵添加劑,正確選擇需綜合考慮以下因素:
1. 血清的來源與質(zhì)量認(rèn)證
產(chǎn)地:不同來源(如澳洲、南美、北美)的血清成分可能差異較大。
南美血清:價格較低,適合普通細(xì)胞系。
澳洲或新西蘭血清:監(jiān)管嚴(yán)格,內(nèi)毒素低,適合干細(xì)胞、原代細(xì)胞或敏感細(xì)胞。
國產(chǎn)血清:來源可靠批次穩(wěn)定,價格比進(jìn)口便宜質(zhì)量有保障,目前國內(nèi)做的比較好的SERANA品牌,尤其是AD級胎牛血清,為主打產(chǎn)品。
質(zhì)量認(rèn)證:
檢查是否通過 病毒檢測(如BVDV、支原體、噬菌體等)。
是否有 ISO 9001/13485認(rèn)證 或 GMP級生產(chǎn)(對臨床前研究尤為重要)。
關(guān)注 內(nèi)毒素水平(越低越好,通常需≤10 EU/mL)。
2. 血清的營養(yǎng)成分
總蛋白含量:一般在30-45 mg/mL之間,過高可能含過多雜質(zhì),過低可能營養(yǎng)不足。
關(guān)鍵生長因子:如IGF-1、EGF、FGF等,需根據(jù)細(xì)胞類型選擇(如神經(jīng)細(xì)胞需要更高神經(jīng)生長因子)。
球蛋白(IgG)含量:若進(jìn)行免疫相關(guān)實(shí)驗(yàn)(如疫苗生產(chǎn)),需低IgG或無IgG血清。
3. 適用性與批次測試
細(xì)胞類型匹配:
原代細(xì)胞或干細(xì)胞:需高等級血清(如:SERANA 胎牛血清/BUNSEN胎牛血清)
腫瘤細(xì)胞或常規(guī)細(xì)胞系:可選擇經(jīng)濟(jì)型血清。(如:SERANA AD級胎牛血清、/BUNSEN胎牛血清)
批次測試:
購買前要求供應(yīng)商提供 小樣,進(jìn)行細(xì)胞增殖、貼壁率、克隆形成率等測試。
關(guān)注血清的 促生長能力 和 細(xì)胞形態(tài)維持效果。
4. 滅活處理
熱滅活(56℃, 30分鐘):
可滅活補(bǔ)體系統(tǒng),減少免疫實(shí)驗(yàn)干擾。
但會破壞部分生長因子,通常僅在特定實(shí)驗(yàn)(如免疫學(xué)、干細(xì)胞分化)中需要。
非滅活血清:適用于大多數(shù)常規(guī)培養(yǎng),保留更多活性成分。
5. 價格與供應(yīng)鏈穩(wěn)定性
避免低價陷阱:低價血清可能來源不明或質(zhì)量不穩(wěn)定。
選擇可靠供應(yīng)商:品牌授權(quán)代理商渠道購買。
批量采購:同一實(shí)驗(yàn)盡量使用同一批次血清,減少批次差異影響。
胎牛血清對細(xì)胞的用途
促進(jìn)細(xì)胞增殖:
提供生長因子(如IGF、FGF)和激素,刺激細(xì)胞分裂。
營養(yǎng)支持:
含葡萄糖、氨基酸、維生素、微量元素等基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)。
保護(hù)細(xì)胞:
抗胰酶活性(保護(hù)細(xì)胞在傳代時免受損傷)。
緩沖pH波動,維持培養(yǎng)液穩(wěn)定性。
貼壁與鋪展:
提供纖維連接蛋白(Fibronectin)、層粘連蛋白(Laminin)等,幫助貼壁依賴性細(xì)胞附著。
運(yùn)輸脂類與激素:
白蛋白等結(jié)合蛋白協(xié)助疏水性分子(如膽固醇、激素)的運(yùn)輸。
注意事項(xiàng)
潛在風(fēng)險:
批次間差異可能影響實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。
存在未知成分(如外泌體、殘留抗體),可能干擾特定實(shí)驗(yàn)。
替代方案:
無血清培養(yǎng)基:適合成分明確的實(shí)驗(yàn)(如藥物篩選),但需額外添加生長因子。
合成血清替代物:如KnockOut™ SR,用于干細(xì)胞培養(yǎng)。
總結(jié)
選擇胎牛血清需結(jié)合細(xì)胞類型、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮唾|(zhì)量要求。建議優(yōu)先通過小樣測試驗(yàn)證效果,并確保供應(yīng)商提供完整質(zhì)檢報告。對于關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)(如發(fā)表論文、藥物開發(fā)),推薦使用高規(guī)格血清以減少風(fēng)險。
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