標簽：Elisa 本生試劑盒 標準品 抗體 封板膜 一次性吸頭 大鼠試劑盒
 

　　以下是天正信達關(guān)于大鼠ELISA試劑盒加樣實驗常見問題的解答及解決方案：
 

　　一、加樣不準確問題‌
 

　　移液器校準不當‌
 

　　需定期用標準砝碼校準移液器，特別是小體積加樣(如5-10μL)。
 

　　加樣時吸頭需垂直插入液體，緩慢勻速操作，避免氣泡產(chǎn)生。
 

　　加樣時間過長‌
 

　　單次加樣時間控制在10分鐘內(nèi)，樣本較多時分批操作。
 

　　使用多道移液器可提高效率，減少孔間差異。
 

　　液體殘留或濺灑‌
 

　　加樣后檢查孔壁是否殘留液體，用吸水紙輕拭酶標板表面。
 

　　加酶試劑時避免快速操作，防止液體濺出孔外。
 

　　二、樣本處理問題‌
 

　　血清/血漿樣本‌
 

　　血清需靜置1-2小時后離心(3000rpm，15分鐘);血漿需采血后立即混勻抗凝劑再離心。
 

　　溶血或脂血樣本需離心后取上清，避免血紅蛋白干擾。
 

　　樣本保存不當‌
 

　　短期存放于2-8℃，長期保存需-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
 

　　三、實驗操作問題‌
 

　　孵育條件不穩(wěn)定‌
 

　　溫育時使用恒溫箱(37℃±0.5℃)，避免溫度波動。
 

　　封板膜需一次性使用，防止蒸發(fā)和污染。
 

　　洗滌不凈‌
 

　　每孔注滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)4-6次，最后拍干。
 

　　自動洗板機需檢查管路是否堵塞。
 

　　顯色異常‌
 

　　TMB顯色需避光，反應(yīng)時間控制在15-30分鐘，及時終止。
 

　　若顯色過弱，檢查酶標抗體活性或延長孵育時間。
 

　　四、質(zhì)量控制建議‌
 

　　設(shè)置對照‌
 

　　必須包含空白孔、陰性對照和陽性對照，驗證實驗有效性。
 

　　重復(fù)性差處理‌
 

　　復(fù)孔加樣需使用同一移液器，保持操作一致性。
 

　　板內(nèi)變異系數(shù)應(yīng)<15%，否則需排查加樣或洗滌問題。
 

　　五、其他注意事項‌
 

　　試劑污染‌：避免使用含NaN3的緩沖液(抑制HRP活性)。
 

　　環(huán)境控制‌：操作臺需清潔，移液器吸頭一次性使用。
 

　　具體問題可結(jié)合試劑盒說明書調(diào)整。
 

　　注：以上資料僅供參考，不作為實際標準，具體請咨詢技術(shù)老師。
 

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