人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒說明書概要? ?一、產(chǎn)品基本信息? ?產(chǎn)品名稱?:人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1B(LRP1B)ELISA試劑盒 ?用途?:用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等人源樣本中的LRP1B濃度,僅限科研實(shí)驗(yàn)使用。 ?規(guī)格?:48T/96T(T代表測試次數(shù)或孔數(shù))?。 ?保質(zhì)期?:一般為6個(gè)月至12個(gè)月,具體以試劑盒外包裝標(biāo)簽為準(zhǔn)?。 ?二、試劑盒組成? ?預(yù)包被酶標(biāo)板?:含有固定量的抗LRP1B抗體。 ?標(biāo)準(zhǔn)品?:用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,已知濃度的LRP1B蛋白溶液。 ?樣本稀釋液?:用于稀釋樣本,以便在檢測范圍內(nèi)進(jìn)行測量。 ?檢測抗體?:標(biāo)記有酶(如辣根過氧化物酶)的抗LRP1B抗體。 ?洗滌液?:用于洗滌酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的物質(zhì)。 ?底物?:如TMB,與酶反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化,用于檢測?。 ?終止液?:停止酶反應(yīng),使顏色變化穩(wěn)定?。 ?使用說明書?:詳細(xì)操作步驟、注意事項(xiàng)等。 ?三、檢測原理? 采用抗體夾心法:樣本中的LRP1B與預(yù)包被在酶標(biāo)板上的抗體結(jié)合,再加入標(biāo)記有酶的抗LRP1B抗體形成復(fù)合物。經(jīng)過洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入底物產(chǎn)生顏色變化。顏色深淺與樣本中的LRP1B濃度呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀測量吸光度值,計(jì)算樣本濃度。 ?四、樣本準(zhǔn)備與保存? ?樣本收集?:使用無熱原、無內(nèi)毒素的試管收集血清或血漿樣本,避免溶血、高血脂樣本。組織勻漿或細(xì)胞上清液樣本需離心去除沉淀?。 ?樣本保存?:樣本應(yīng)盡早檢測,若不及時(shí)檢測,應(yīng)分裝后冷凍保存(-20℃或-80℃),避免反復(fù)凍融。 ?五、操作步驟? ?加樣?:向酶標(biāo)板中加入標(biāo)準(zhǔn)品和稀釋后的樣本。 ?孵育?:在溫度和時(shí)間內(nèi)孵育,使樣本中的LRP1B與抗體結(jié)合。 ?洗滌?:使用洗滌液洗滌酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的物質(zhì)。 ?加檢測抗體?:向酶標(biāo)板中加入標(biāo)記有酶的抗LRP1B抗體,孵育。 ?再次洗滌?:重復(fù)洗滌步驟。 ?加底物顯色?:向酶標(biāo)板中加入底物,孵育使顏色發(fā)展。 ?終止反應(yīng)?:加入終止液停止反應(yīng)。 ?讀板?:使用酶標(biāo)儀在波長下測量吸光度值。 ?六、注意事項(xiàng)? 嚴(yán)格按照說明書操作,避免交叉污染。 加樣時(shí)應(yīng)確保每孔體積一致,避免產(chǎn)生氣泡。 孵育時(shí)間和溫度需嚴(yán)格控制。 洗滌步驟應(yīng)充分且。 讀取結(jié)果時(shí)應(yīng)在終止反應(yīng)后的規(guī)定時(shí)間內(nèi)進(jìn)行。 |