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核酸電泳系列
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產品信息
產品名稱
產品編號
規(guī)格
Agarose瓊脂糖
HRF1011
100 g
HRF1012
500 g
產品描述
瓊脂糖(Agarose)是純化的線性半乳聚糖親水膠體,提取自瓊脂或者含瓊脂的海藻,結構上是一種線性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基構成。作為一種凝膠試劑,常用于通過凝膠電泳或者印跡法(如Northern或Southern)來進行日常核酸分析,也適用于蛋白應用,如輻射狀免疫擴散(RID)實驗。瓊脂糖的基本參數(shù),包括:1)硫酸鹽含量(sulfate content)——純度指標,因為硫酸根是存在瓊脂糖內的主要離子基團;2)凝膠強度(gel strength)——施加于凝膠使之斷裂的外力;3)膠凝點(Gel point)——水溶性瓊脂糖溶液冷卻后形成凝膠時的溫度。液體向凝膠轉化的過程中,瓊脂糖溶液具有滯后性,因此,膠凝點不等同于膠熔點;4)電滲(EEO)——液體穿透凝膠的一種電動運動。瓊脂糖凝膠內的陰離子基團吸附在基質上不會發(fā)生遷移,但是解離的陽離子就會朝負極遷移,從而產生電滲。由于生物聚合物的電泳遷移通常是朝負極運動,則EEO產生的內部對流會干擾分離效率。
產品性質
CAS號(CAS NO.)
9012-36-6
外觀(Appearance)
白色至類白色粉末
凝膠強度(Gel Strength, 1.0%)
≥1200 (g/cm2)
膠凝溫度域(Geling Range, 1.5%)
36±1.5℃
熔膠溫度域(Melting Range, 1.5%)
88±1.5℃
電滲值(EEO, -mr)
≤0.13
硫酸鹽(Sulfate, %)
≤0.15%
水分(Moisture)
≤10%
DNA酶(DNase)
None Detected
RNA酶(RNase)
蛋白酶(Protease)
運輸和保存方法
室溫運輸和保存即可。有效期5年。
操作流程:
1.凝膠制備方法
1.配制適量的電泳及制膠用的緩沖液。根據(jù)電泳需要,配置合適濃度的電泳及制膠緩沖液。
注:用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須是相同的。
2.根據(jù)制膠量及凝膠濃度,在加有一定量的電泳緩沖液的三角錐瓶中,加入準確稱量的瓊脂糖粉(總液體量不宜超過三角錐瓶的 50%容量)。
2.在微波爐中加熱溶解瓊脂糖,設置高火加熱至沸騰,保持膠液沸騰約 30 秒鐘,戴上防熱手套,移開三角錐瓶,小心搖動三角錐瓶,重懸未溶解顆粒,再次用高火加熱 1-2 分鐘,或直至瓊脂糖溶解。請戴上防熱手套,小心搖動三角錐瓶,使瓊脂糖膠液充分均勻。
注:必須保證瓊脂糖充分溶解,此時瓊脂糖膠液清澈,否則,會造成電泳圖像模糊不清。
加熱時如膠液劇烈沸騰發(fā)泡,停止加熱。微波爐中加熱時間不宜過長。
4.使溶液冷卻至 60℃左右,如需要可在此時加入溴化乙錠(EB)溶液使其終濃度為0.5ug/ml,
并充分混勻。
注:溴化乙錠是一種致癌物質。使用含有溴化乙錠的溶液時,請戴用手套。
5.將瓊脂糖溶液倒入制膠模中,然后在適當位置處插上梳子。凝膠厚度一般在 3-5mm 之間。
6.在室溫下使膠凝固(大約 30 分鐘-1 小時),然后放置于電泳槽中進行電泳。
注:凝膠不立即使用時,請用保鮮膜將凝膠包好后在 4℃下保存,一般可保存 2~5 天。
本產品僅作科研用途!
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